NEBNext Library Quant Kit for Illumina
カタログ番号 |
サイズ |
濃度 |
価格(税別) |
保存温度 |
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E7630S | 100 reactions | ¥18,800 | -20C | |
E7630L | 500 reactions | ¥79,800 | -20C |
製品カテゴリ>グループ
- NEBNext次世代シーケンサー用ライブラリー調製試薬>ライブラリー定量試薬
備考
- 備考:価格改定 (2023年4月1日)
特徴
NGSライブラリー定量キット(qPCR) | 製品資料はこちら( | )
NEBNext Library Quant KitはリアルタイムqPCRによりNGSライブラリーを定量するキットである。Bioanalyzer機器による定量と比較して正確にNGSライブラリーの収量を定量することができる上、他社同等品よりも高い正確性と再現性でライブラリーを定量することが可能である。
品質の高いNGSデータを得るためには、最適な量のライブラリーをNGS機器にアプライすることが必要不可欠である。本キットはライブラリーの濃度を正確に定量することができるので、フローセル上で最適な密度のクラスターを形成させることができ、品質の高いNGSデータが取得可能となる。
特長: | |||
・ | Illumina NGS用ライブラリー定量キット | ・ | 定量用プライマーミックス付属 |
・ | qPCRにより正確かつ高い再現性で定量 | ・ | スタンダードDNA付属(6種類の濃度)※ |
・ | 最適密度のクラスター形成に不可欠な定量性 | ・ | ROX付属(2種類の濃度)で様々なqPCR機器に対応 |
※スタンダードが6本となり、より幅広い濃度における検量線の作成が可能になった。従来の4濃度のスタンダードとの互換性を維持するため、ナンバリングが変更されている(Standard 1-4はStandard 2-5に対応する)。4濃度のスタンダードと6濃度のスタンダードの両方のプロトコルに対応している。詳しくはマニュアルを参照のこと。
本製品を使用したライブラリー定量例、競合他社製品との比較データなどはを参照。
NEBNext Library Quant Kitを用いた際の典型的な増幅曲線と検量線
Bio-Rad CFX96 Touch (A) および Applied Biosystems 7500 Fast リアルタイム qPCR 装置 (B) で NEBNext Library Quant Kit を使用した結果。左側が増幅曲線、右側が標準曲線を示す。どちらのプラットフォームでもデフォルト設定を使用した。ABI 7500 Fast のアッセイには、1X ROX (低濃度) と ROX の正規化が含まれている。
様々なGC含有量とサイズのライブラリーより最適な密度のクラスターを形成
様々なGC含有量とサイズのライブラリーをLibrary Quant Kitで定量した後、それぞれを8 pMに希釈してMiSeq(v2 chemistry; MCS v2.4.1.3)にアプライした。その結果、全てのライブラリーは最適な密度のクラスター(965-1300 k/mm2, ave.=1199)を形成することが示された。ライブラリー濃度(7-120 nM)は上段のドット、クラスター密度は下段のカラムで示している。
NEBNext Library Quant Kitにより最適な密度のクラスターを形成
様々なライブラリーをNEBNext Library Quant Kitと他社同等製品で定量した後にクラスター密度を比較した結果、当社製品で定量した方が、最適な密度のクラスター(900-1300 k/mm2, ave.=1160)を形成することが示された。定量したライブラリー(2-200 nMの濃度)は8 pMに希釈してMiSeq(v2 chemistry; MCS v2.4.1.3)にアプライして検証した。
プロトコール
製品内容
キット内容:
・NEBNext Library Quant Master Mix
・NEBNext Library Quant Primer Mix
・NEBNext Library Quant DNA Standard 1
・NEBNext Library Quant DNA Standard 2
・NEBNext Library Quant DNA Standard 3
・NEBNext Library Quant DNA Standard 4
・NEBNext Library Quant DNA Standard 5
・NEBNext Library Quant DNA Standard 6
・ROX (Low)
・ROX (High)
・NEBNext Library Dilution Buffer
保存温度:
-20℃
メモ
【2020年12月22日:マニュアルを更新しました】
酵素ミックスとプライマーミックスの混合方法を更新 (各章、Manual Vesrion 5.0_10/20)