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NEBNext Library Quant Kit for Illumina

NEBNext Library Quant Kit for Illuminaカタログ番号:E7630

カタログ番号

サイズ

濃度

価格(税別)

保存温度

E7630S 100 reactions ¥18,800 -20C
E7630L 500 reactions ¥79,800 -20C

製品カテゴリ>グループ

  • NEBNext次世代シーケンサー用ライブラリー調製試薬>ライブラリー定量試薬

備考

  • 備考:価格改定 (2023年4月1日)

特徴

NGSライブラリー定量キット(qPCR) 製品資料はこちら( image

 

NEBNext Library Quant KitはリアルタイムqPCRによりNGSライブラリーを定量するキットである。Bioanalyzer機器による定量と比較して正確にNGSライブラリーの収量を定量することができる上、他社同等品よりも高い正確性と再現性でライブラリーを定量することが可能である。

 

品質の高いNGSデータを得るためには、最適な量のライブラリーをNGS機器にアプライすることが必要不可欠である。本キットはライブラリーの濃度を正確に定量することができるので、フローセル上で最適な密度のクラスターを形成させることができ、品質の高いNGSデータが取得可能となる。

 

特長:
Illumina NGS用ライブラリー定量キット 定量用プライマーミックス付属
qPCRにより正確かつ高い再現性で定量 スタンダードDNA付属(6種類の濃度)※
最適密度のクラスター形成に不可欠な定量性 ROX付属(2種類の濃度)で様々なqPCR機器に対応

 

※スタンダードが6本となり、より幅広い濃度における検量線の作成が可能になった。従来の4濃度のスタンダードとの互換性を維持するため、ナンバリングが変更されている(Standard 1-4はStandard 2-5に対応する)。4濃度のスタンダードと6濃度のスタンダードの両方のプロトコルに対応している。詳しくはマニュアルを参照のこと。

 

本製品を使用したライブラリー定量例、競合他社製品との比較データなどはこちらのページ(英語)を参照。

 

NEBNext Library Quant Kitを用いた際の典型的な増幅曲線と検量線

image

Bio-Rad CFX96 Touch (A) および Applied Biosystems 7500 Fast リアルタイム qPCR 装置 (B) で NEBNext Library Quant Kit を使用した結果。左側が増幅曲線、右側が標準曲線を示す。どちらのプラットフォームでもデフォルト設定を使用した。ABI 7500 Fast のアッセイには、1X ROX (低濃度) と ROX の正規化が含まれている。

 

Bioanalyzerや他社同等製品より高い正確性と再現性で定量 図をクリックして拡大表示
(A) Bioanalyzerより正確に定量   (B) 他社同等品より正確に定量
image    image
様々なライブラリーをBioanalyzerとNEBNext Library Quant Kitで定量した結果、Library Quant Kitの方が高い正確性と再現性でライブラリーを定量することができることが示された。定量性はヒト、大腸菌、マラリア原虫をそれぞれ2-4回定量することにより検証した。  

NEBNext Library Quant kitと他社同等製品の定量性を比較した結果、Library Quant Kitの方が高い正確性と再現性でライブラリーを定量することができることが示された。定量性は4名の研究者がヒト、大腸菌のライブラリーをそれぞれ2-4回て医療することにより検証した。 

 

様々なGC含有量とサイズのライブラリーより最適な密度のクラスターを形成

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様々なGC含有量とサイズのライブラリーをLibrary Quant Kitで定量した後、それぞれを8 pMに希釈してMiSeq(v2 chemistry; MCS v2.4.1.3)にアプライした。その結果、全てのライブラリーは最適な密度のクラスター(965-1300 k/mm2, ave.=1199)を形成することが示された。ライブラリー濃度(7-120 nM)は上段のドット、クラスター密度は下段のカラムで示している。

 

NEBNext Library Quant Kitにより最適な密度のクラスターを形成

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様々なライブラリーをNEBNext Library Quant Kitと他社同等製品で定量した後にクラスター密度を比較した結果、当社製品で定量した方が、最適な密度のクラスター(900-1300 k/mm2, ave.=1160)を形成することが示された。定量したライブラリー(2-200 nMの濃度)は8 pMに希釈してMiSeq(v2 chemistry; MCS v2.4.1.3)にアプライして検証した。

製品内容

キット内容:

NEBNext Library Quant Master Mix

・NEBNext Library Quant Primer Mix

・NEBNext Library Quant DNA Standard 1

・NEBNext Library Quant DNA Standard 2

・NEBNext Library Quant DNA Standard 3

・NEBNext Library Quant DNA Standard 4

・NEBNext Library Quant DNA Standard 5

・NEBNext Library Quant DNA Standard 6

・ROX (Low)

・ROX (High)

・NEBNext Library Dilution Buffer


保存温度:

-20℃

メモ

【2020年12月22日:マニュアルを更新しました】

酵素ミックスとプライマーミックスの混合方法を更新 (各章、Manual Vesrion 5.0_10/20)