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NEB の大腸菌コンピテントセル (クローニング用)
 

クローニングする DNA の種類やサイズ、その後のアプリケーションにより、形質転換に用いる大腸菌コンピテントセルを使い分けることが重要である。NEB では様々なラインナップを提供している。

   
 

特長:

 

・高い形質転換効率:米国で製造、日本に輸入しても同等の品質

  ・ライゲーション、NEBuilder / Gibson アッセンブル溶液を直接使用可能、精製や希釈は不要
  ・アニマルフリーおよび T1 ファージ耐性
  ・Outgrowth 培地が付属
  ・毒性遺伝子のクローニングなど、様々な目的に対応できるラインナップ
  ・バルクサイズやカスタム提供が可能
  ・5 分間形質転換プロトコールも提供
   
NEB コンピテントセル (クローニング用) 選択チャート
 
 製品  特長

 形質転換効率

 cfu/μg pUC19 DNA

 NEB 5-alpha

 Competent E. coli

 ・DH5α 派生株

 ・一般的なクローニング

 ・青/白スクリーニングが可能

 ・サブクローニング用グレード製品も販売*

 1-3 x 10^9

 (*1-5 x 10^8)

 NEB 10-beta

 Competent E. coli

 ・DH10B 派生株

 ・大きなプラスミドのクローニング (>10 kb など)

 ・制限システム欠損による哺乳類ゲノムの直接クローニングが可能

 ・青/白スクリーニングが可能

 ・エレクトロポレーション用も販売

 1-3 x 10^9

 NEB Stable

 Competent E. coli

 ・レトロ/レンチウイルスベクターのクローニング

 ・リピート配列を含む不安定な遺伝子のクローニング

 ・青/白スクリーニングが可能

 1-3 x 10^9

 NEB Turbo

 Competent E. coli

 ・6.5 時間でコロニーを形成

 ・コロニーから 4 時間でプラスミド調製可能

 ・リピート配列を含む不安定な遺伝子のクローニング

 ・青/白スクリーニングが可能

 1-3 x 10^9

 dam-/dcm-

 Competent E. coli

 ・Dam/Dcm メチル化フリープラスミドの調製が可能

 ・下流に dam/dcm メチル化感受性制限酵素を使う場合に効果的

 1-3 x 10^6

 NEB 5-alpha F'Iq

 Competent E. coli 

 ・毒性遺伝子のクローニング

 ・厳密な発現制御によりベーサル発現を抑制

 ・青/白スクリーニングが可能

 1-3 x 10^9

 NEB Cloning

 Competent E. coli

 Sampler

 ・4 種類のコンピテントセルのセット

 ・5-alpha、10-beta、Stable、Turbo

 -
   
   
形質転換効率
  形質転換の成功の鍵は、正しい大腸菌コンピテントセルの選択と形質転換効率である。NEB が提供するコンピテントセルはいずれも高い形質転換効率を示し、米国で製造したものを日本に輸入した後もその性能と品質は変わらない。
 

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  各クローニング用コンピテントセルについて、同等品との形質転換効率を比較した。各社推奨プロトコールに従って pUC19 を形質転換、出現コロニー数をカウントして効率を求めた。なお記載の 4 種類は NEB Cloning Competent E.coli Sampler に含まれている。
   
   
製品フォーマット
 
 製品  50 ul x  20 本  200 ul x 12 本  96 穴プレート  エレクトロポレーション用  サブクローニング用
 NEB 5-alpha  C2987H  C2987I  C2987  -  C2988J
 NEB 10-beta  C3019H  C3019I  C3019P  C3020K  -
 NEB Stable  C3040H  C3040I  -  -  -
 NEB Turbo  C2984H  C2984I  -  -  -
 dam-/dcm-  C2925H  C2925I  -  -  -
 NEB 5-alpha F'Iq  C2922H  C2992I  -  -  -

 

 

 

 

技術資料&オンラインツール
image Competent Cell (冊子、英語)
image 形質転換のヒント
image トラブルシューティング・ガイド
image 他社同等品リスト
image NEBioCalculator : 分子生物実験に便利な計算ツール

 

NEB TV (動画)

 
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形質転換の方法

 

形質転換効率向上のヒント

 

形質転換の原理

 

 

 

 

クローニングテクニカルガイド image  

 

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