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LongAmp Hot Start Taq 2X Master Mix

LongAmp Hot Start Taq 2X Master Mixカタログ番号:M0533

カタログ番号

サイズ

濃度

価格

保存温度

M0533S 100 reactions 2X ¥34,000 -20C
M0533L 500 reactions 2X ¥137,000 -20C

製品カテゴリ>グループ

  • ポリメラーゼ&増幅技術>その他のPCR酵素

備考

  • 備考:価格改定 (2023年4月1日)

特徴

ロングPCRに最適

 

特長:

・λDNAおよびヒトゲノムDNAから最長30 kbを増幅可能

・Taqの2倍の正確性

・非特異的増幅を抑制するホットスタート仕様

・便利なマスターミックス仕様

 

説明:

LongAmp Hot Start Taq 2X Master Mixは長いターゲットを高い正確性で増幅するホットスタート仕様のPCRマスターミックスである。テンプレートがλDNAの場合40kb、ヒトゲノムDNAの場合30 kbの増幅が可能である。正確性はTaqの2倍である。Hot Start TaqおよびDeep Vent DNA ポリメラーゼが最適な配合でブレンドされている。

アプタマーベース技術を利用したホットスタート仕様であり、独自の合成アプタマーが非共有結合でポリメラーゼに可逆的に結合することにより45℃以下でのポリメラーゼ活性を抑制している。そのため室温でのPCR反応セットアップが可能である。アプタマーは通常のサイクル反応条件下(最初の熱変性ステップ)でポリメラーゼから解離するため、サイクル反応前の高温活性化ステップは不要である。ホットスタート仕様を用いることでプライマーダイマーおよび非特異的産物の増幅を抑制できる上、サンプルを高温にさらす回数を減らし、反応時間も短縮できる。

 


LongAmpGelImage

図1:LongAmpTaq ポリメラーゼによる増幅:
LongAmp Taq DNAポリメラーゼを用いて、ヒト ゲノムDNAより様々なターゲットを増幅した。その結果、0.5-30 kbのターゲットが非常に高い特異性で増幅されることが示された。
マーカーM: 1kb DNA ラダー(NEB #N3232

酵素特性および使用方法

ユニットアッセイ条件:
1X ThermoPol反応バッファー、200 μMdNTP、[3H]-dTTPおよび15 nM活性型M13 DNAで反応

 

反応条件:
1X LongAmp Hot Start Taq Master Mix

 

1X Master Mix組成:
・60 mM Tris-SO4
・20 mM (NH4)2SO4
・2 mM MgSO4
・3% Glycerol
・0.06% IGEPAL CA-630
・0.05% Tween 20
・0.3 mM dNTPs
・125 units/ml LongAmp Hot Start Taq DNA Polymerase
pH 9.1 @ 25°C

 

熱による不活性化:
不可