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Quick CIP

Quick CIPカタログ番号:M0525

カタログ番号

サイズ

濃度

価格

保存温度

M0525S 1,000 units 5,000 units/ml ¥11,000 -20C
M0525L 5,000 units 5,000 units/ml ¥53,000 -20C

製品カテゴリ>グループ

  • DNA修飾酵素&クローニング>DNAキナーゼ&DNAホスファターゼ

特徴

特長:

・DNA と RNA の 5'/3' 末端を脱リン酸化

・ベクターの脱リン酸化によるセルフライゲーションの防止

・PCR 産物中の未反応の dNTPs を分解(PCR 産物のクリーンアップには Exo-CIP を推奨)

・80 ℃、2 分間で簡単に不活性化(フェノール/クロロホルムでの精製不要)

 

従来品(CIP、M0290)との違い:

・熱による不活性化が可能

・脱リン酸化速度が向上(反応時間の短縮が可能)

・安定性が向上

・リコンビナント酵素

 

由来:

リコンビナント(子ウシの腸粘膜由来のアルカリホスファターゼ遺伝子をクローニング、酵母 Pichia pastorisで発現)

 

付属試薬:

・CutSmart Buffer

酵素特性および使用方法

ユニット定義:

One unit is defined as the amount of enzyme that hydrolyzes 1 μmol of p-Nitrophenyl Phosphate, PNPP (NEB #P0757) in a total reaction volume of 1 ml in 1 minute at 37°C.

 

反応条件:

1X CutSmart Buffer 

37℃でインキュベート

 

CutSmart Buffer 組成(1x):

・50 mM Potassium Acetate 

・20 mM Tris-acetate 

・10 mM Magnesium Acetate 

・100 µg/ml BSA 

(pH 7.9 @ 25°C)

 

保存温度:

-20°C

 

酵素保存液組成:

・25 mM Tris-HCl 

・1 mM MgCl2 

・0.1 mM ZnCl2 

・50% Glycerol 

pH 7.5 @ 25°C

 

熱による不活性化:

80°C、2分間

 

ユニットアッセイ条件:

1 M diethanolamine-HCl (pH 9.8), 0.5 mM MgCl2, 50 mM p-Nitrophenyl Phosphate. These conditions are only used for quantitating enzyme activity.

メモ

1)Quick CIP, as are most alkaline phosphatases, is a Zn2+ and Mg2+-dependent enzyme. Our formulation has tightly bound zinc atoms in the active center and does not require supplemental zinc or other additives.

 

2)Quick CIP is also active in 1X NEBuffers 1.1, 2.1, 3.1 as well as NEBuffers 1, 2, 3 and 4.

 

3)Quick CIP activity is enhanced in the presence of monovalent salts.

 

4)Quick CIP is inhibited by metal chelators (e.g. EDTA), inorganic phosphate and phosphate analogs.

 

5)The Quick CIP activity is decreased in the presence of reducing agents (DTT, β-mercaptoethanol).

 

6)Quick CIP is a homodimer. The molecular weight of the monomer is 56 kDa.