RNase HII
カタログ番号 |
サイズ |
濃度 |
価格 |
保存温度 |
|---|---|---|---|---|
| M0288S | 250 units | 5,000 units/ml | ¥13,600 | -20C |
| M0288L | 1,250 units | 5,000 units/ml | ¥55,000 | -20C |
製品カテゴリ>グループ
- ＲＮＡ研究用試薬>RNase & RNase阻害剤
備考
- 備考：価格改定 (2023年4月1日)
特徴
・ ポリメラーゼ産物のリボヌクレオチド取り込み部位をニッキング
・ T7 Endo Iと共に使用してリボヌクレオチド取込み部位で2本鎖を切断
・ 岡崎フラグメント、RNA / DNAハイブリッドのRNA鎖の分解
説明:
Ribonuclease HII（RNase HII）は2本鎖DNAのリボヌクレオチドの5′側に優先的にニックを入れるエンドリボヌクレアーゼである。5′リン酸および3′ヒドロキシ末端を産生する。また岡崎フラグメントのRNA鎖側に複数のニックを導入する。
由来:
E.coli由来のRNase HII（rnhB）遺伝子とマルトース結合タンパク質（MBP）をコードする遺伝子の融合遺伝子を有する大腸菌。アフィニティークロマトグラフィーで精製後、Factor XaによりMBPをRNase HIIから切り離し、さらにMBPおよびFactor Xaを除去する。MBPが切り離されたRNase HIIのN末端には4アミノ酸残基（Ile-Ser-Glu-Phe）が付加している。
付属試薬：
ThermoPol Reaction Buffer (10X)
プロトコール
酵素特性および使用方法
ユニット定義：
1 unitは、1X ThermoPol Reaction Buffer中、37℃、30分間で、100 pmolの合成2本鎖DNA基質にニックを挿入し、それに相当する蛍光シグナルを発するために必要な酵素量として定義される。2本鎖DNA基質は蛍光色素分子 / クエンチャーペアのクエンチャー付近にリボヌクレオチドを1塩基含む。
反応条件：
1X ThermoPol Reaction Buffer
37℃でインキュベーション
品質管理：
エキソヌクレアーゼとエンドヌクレアーゼのコンタミネーションが無いことを確認
濃度：
5,000 units/ml
